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1、一般我們摸索抗體的工作濃度及反應條件都是采用點雜交，只需一塊很小的膜，一般我們用膜的邊角料，一般直接將蛋白點在膜上即可，每次2ul 然后烘干，反復點樣大約8ul 左右即可，注意點樣時，用槍頭尖把蛋白向四周拔下，然后直接抗體孵育顯色即可，抗體稀釋液一般100ul 即可，這樣即節(jié)省抗體，又節(jié)省膜。

2、另說一下我們實驗室孵育抗體的方法：

告訴你一種較好的節(jié)省抗體的方法，我們一般用96或24孔板的盒蓋用封口膜封住作為反應板，先鋪約1ml抗體稀釋液，用反貼法，膜正面向下，注意不能有氣泡，可用膠鏟或找個干凈的試管在膜上滾動去除氣泡，再加0.5 覆蓋足夠，還可以回收約1ml ，回收后的抗體有疊氮鈉加0.2%,保存于-20度，可放時間長點，我最長1月用，效果尚可，沒有的話直接放在4度，一般一周內使用沒問題，我們一般重復1次使用，二抗建議不要重復使用，酶太容易失效了，再說二抗很便宜，別省這點錢。但要注意，要把反應板用另一個對稱的96或24孔板蓋子蓋好，然后保鮮膜包好，并放在濕盒以防抗體揮發(fā)。

PS：1）建議大家可去收集做MTT 實驗的同學或其他人的96或24孔板的盒蓋，最好找到不同牌子的板子，這樣更容易找到兩塊可以對稱蓋好的盒蓋

2）封口膜大約150元一卷，做反應板時只要剪一半即可，封口時雙手盡量將封口膜向四周拉，然后覆蓋盒蓋即可，一般我封3層，怕破嘛，哈，新手肯定要多練習，我剛開始時，用老大一塊膜才封好一層，現(xiàn)在只要四分子一塊即可。