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茶花基因組DNA的提取
采用CTAB法提取DNA，所有試劑（有機(jī)溶劑除外）和器皿都經(jīng)高壓滅菌，主要步驟如下：
（1）取兩片幼嫩新鮮葉片，置于預(yù)冷的研缽中，倒入適量液氮，迅速研磨成粉末狀，隨后加入3ml預(yù)熱的2%CTAB抽提緩沖液和50ul抗氧化劑2-巰基乙醇，繼續(xù)研磨成略有流動(dòng)性的糊狀或粥狀，轉(zhuǎn)入1.5ml的離心管中，于65℃水浴鍋中保溫約60min.
(2)待混合物冷卻至室溫后加入等600ul的CI（氯仿：異戊醇=24：1）溶液混勻，輕輕顛倒離心管幾次使管內(nèi)混合物成乳濁液，常溫下10000rpm離心10min,取上清液轉(zhuǎn)入另一干凈的離心管中。
（3）重復(fù)步驟（2）一次。
（4）取步驟（3）上清液加入2.5倍體積無(wú)水乙醇，仔細(xì)混勻，-20冰箱30min以上，沉淀DNA4℃，12000rpm離心10min.
(5)棄去上層有機(jī)溶劑，加500ul75%乙醇洗滌沉淀，4℃下8000rpm離心5min,棄去上清，洗滌沉淀3次。
（6）倒置或者37度培養(yǎng)箱烘干.
(7)加50ulTE緩沖液溶解DNA，于-20℃冷藏備用。