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如何提高化學(xué)轉(zhuǎn)化的效率
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用于轉(zhuǎn)化的DNA應(yīng)純化，并重懸于水中或TE緩沖液里；
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加入DNA體積不超過感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10；
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對于純化超螺旋pUC19，100 pg~1 ng的用量時(shí)轉(zhuǎn)化效率最高，但加大DNA用量可提高總克隆數(shù)；
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細(xì)胞最好在冰上解凍，
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管中的最后一點(diǎn)冰融化后，立即加入DNA；
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溫度高于0°C時(shí)，轉(zhuǎn)化效率就開始下降；
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加入DNA后冰育30分鐘。預(yù)計(jì)每縮短10分鐘，轉(zhuǎn)化效率會有2倍左右的損失；
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熱激的溫度和時(shí)間取決于轉(zhuǎn)化體積和離心管壁的厚度，通常為42℃孵育30~90秒；
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熱激后在37°C復(fù)蘇1小時(shí)轉(zhuǎn)化效率最佳。預(yù)計(jì)每縮短15分鐘，轉(zhuǎn)化效率會有2倍左右的損失；
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加入SOC比LB培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)化效率高約2倍；
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復(fù)蘇時(shí)振蕩試管可使轉(zhuǎn)化效率提高2倍。