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產(chǎn)品展示
試劑盒組成:
試劑盒組成
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保存
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20次(RP1201)
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50次
(RP1202)
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裂解液RL
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4℃避光
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25 ml |
55 ml
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沉淀劑A
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室溫
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2 ml
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4 ml
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去蛋白液RE
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室溫
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15ml
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30ml
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漂洗液RD
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室溫
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20ml
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40ml
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漂洗液RW
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4℃(一個(gè)月)
-20℃(長期) |
6 ml | 15 ml |
第一次使用前按說明加指定量乙醇 | |||
RNase-free H2O
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室溫 |
5 ml
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10ml
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70%乙醇
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室溫
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4ml RNase-free H2O
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9ml RNase-free H2O |
第一次使用前按說明加指定量乙醇
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|||
RNase-free
吸附柱RA
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室溫
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20個(gè)
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50個(gè)
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收集管(2ml)
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室溫
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20個(gè)
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50個(gè)
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產(chǎn)品說明:
改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA 酶, 然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜, 再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟, 去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除, 最后低鹽的RNase free water將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。
植物組織RNA提取的難點(diǎn)
1、酚類化合物的干擾
許多植物組織特別是植物的果實(shí)和樹木類植物中富含酚類化合物。酚類物質(zhì)的含量會(huì)隨著植物的生長而增加。因而從幼嫩的植物材料中更容易提取RNA。此外,針葉類植物的針葉中多酚的含量比在落葉植物的葉子中要高得多。在植物材料勻漿時(shí),酚類物質(zhì)會(huì)釋放出來,氧化后使勻漿液變?yōu)楹稚㈦S氧化程度的增加而加深,這一現(xiàn)象被稱為褐化效應(yīng)(brownins effect)。被氧化的酚類化合物(如醌類)能與RNA穩(wěn)定地結(jié)合,從而影影響RNA的分離純化。
2、多糖的干擾
多糖的污染是提取植物RNA時(shí)常遇到的另一個(gè)棘手的問題.,植物組織中往往富含多糖,而多糖的許多理化性質(zhì)與RNA很相似,因此很難將它們分開。在去除多糖的同時(shí)RNA也被裹攜走了,造成RNA產(chǎn)量的減少:而在沉淀RNA
時(shí),也產(chǎn)生多糖的凝膠狀沉淀,這種含有多糖的RNA沉淀難溶于水,或溶解后產(chǎn)生粘稠狀的溶液。由于多糖可以抑制許多酶的活性,因此污染了多糖的RNA樣品無法用于進(jìn)一步的分子生物學(xué)研究。
3、蛋白雜質(zhì)的影響
蛋白質(zhì)是污染RNA樣品的又一個(gè)重要因素。由干RNase和多酚氧化酶亦屬于蛋白質(zhì),因而要獲得完整的、高質(zhì)量的RNA就必須有效地去除蛋白雜質(zhì)。
4、次級(jí)代謝產(chǎn)物的影響
從植物組織中提取高質(zhì)量RNA的另一個(gè)難點(diǎn)是許多高等植物組織尤其是成熟組織能產(chǎn)生某些水溶性的次級(jí)代謝產(chǎn)物,這些次級(jí)代謝產(chǎn)物很容易與RNA結(jié)合并與RNA共同被抽提出來而阻礙具有生物活性的RNA的分離。
試劑盒特點(diǎn):
◆ 快速去除多糖,上樣孔無多糖污染:
◆ 獨(dú)特多酚沉淀劑,防多酚氧化同時(shí)沉淀多酚:
◆ 獨(dú)創(chuàng)漂洗液RD,特異性洗掉基因組,確保得到的RNA無基因組污染:
◆ 成功提取進(jìn)口TRIzol及Q公司試劑盒無法很好提取的多種植物RNA,包括仙人掌、仙人球、蘆薈、鳳梨、水仙、黃瓜、辣椒、胡蘿卜、玉米、大豆、百合、小麥、西紅柿、花菜、油菜籽等;
提取范圍:
仙人掌、仙人球、水仙、黃瓜、胡蘿卜、辣椒、西紅柿、煙草、玉米、大豆、百合、小麥、擬南芥和其他大多數(shù)植物。
產(chǎn)量:
每100mg組織10~50μg不等
上一個(gè):TRIplant Reagent 多糖多
下一個(gè):通用植物總RNA提取試劑盒(離心柱型)