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產(chǎn)品展示
原理簡介:
本試劑盒采用改進SDS-堿裂解法裂解細胞,離心吸附柱內(nèi)的硅基質(zhì)膜在高鹽,低pH值狀態(tài)下選擇性地結(jié)合溶液中的質(zhì)粒DNA,再通過去蛋白液和漂洗液將雜質(zhì)和其它細菌成分去除,最后低鹽,高pH值的洗脫緩沖液將純凈質(zhì)粒DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。
注意事項:
◆ 第一次使用時,將試劑盒所帶全部的RNase A加入溶液P1后(終濃度100ug/ml)置于4℃保存。如果溶液P1中RNase A失活,提取的質(zhì)??赡軙谢祀s有微量RNA殘留, 這時可在溶液P1中補加RNase A即可。
◆ 第一次使用前請先在15ml漂洗液WB中加入45ml無水乙醇,加入后請及時在方框打鉤標記已加入乙醇,以免多次加入!
◆ 溫度低時溶液P2中SDS可能會出現(xiàn)渾濁或者析出沉淀,可在37℃水浴加熱幾分鐘,即可恢復澄清,不要劇烈搖晃,以免形成過量的泡沫。
◆ 避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH值變化,各溶液使用后應及時蓋緊蓋子。
試劑盒特點:
◆ 產(chǎn)量高---一次提取高達30ug以上的質(zhì)粒。
◆ 純度高---OD260/OD280一般為1.80~1.85本試劑盒提取的質(zhì)粒純度好,能充分保證測序所需要的讀長(用于ABI3730測序一般可達1000bp有效讀長)。
◆ 快速,方便,不需要使用有毒的苯酚,氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀。
提示
BIOTEKE的質(zhì)粒提取試劑盒既適用于革蘭氏陰性菌中質(zhì)粒的提取,同時也可從革蘭氏陽性菌中提取質(zhì)粒。由于革蘭氏陽性菌外被一層較厚的細胞壁,會嚴重阻礙細菌細胞的裂解,因此必須在裂解細胞前破除,方法如下:
收集適量的菌體,加入250ul溶液P2,充分懸浮菌液,加入溶菌酶使其終濃度在10-20mg/ml左右在37℃處理30分鐘左右。加入溶菌酶的濃度和處理的時間可根據(jù)不同的菌主和具體實驗條件進行調(diào)整。
上一個:預染系列marker