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產(chǎn)品說明:
Supermo Ⅲ M-MLV 反轉(zhuǎn)錄酶是在普通M-MLV基礎上經(jīng)過多次定點突變?nèi)笔Я嗽钢?/span>RnaseH活性,同時增加反轉(zhuǎn)錄酶的熱穩(wěn)定性和擴增活性。RNase H 能夠降解DNA/RNA雜合體中的RNA,因此在cDNA第一條鏈的合成反應中會降低cDNA的擴增長度;缺失了RNase H活性,反轉(zhuǎn)錄可以得到更長的Supermo Ⅲ M-MLV;同時由于引入特定的突變,增加了Supermo Ⅲ M-MLV的擴增活性,使獲得的cDNA更長。在反轉(zhuǎn)錄過程中時當?shù)接袕碗s二級結(jié)構(gòu)的RNA區(qū)域時,反轉(zhuǎn)錄酶便會從模板上脫落下來,無法完成反轉(zhuǎn)錄,此時必須提高反應溫度打開RNA的二級結(jié)構(gòu)才能使反轉(zhuǎn)錄順利進行,這就要求反轉(zhuǎn)錄酶需要有很好的耐熱性。另外當模板RNA的GC含量比較高時,也需要在較高的溫度下反轉(zhuǎn)錄,Supermo Ⅲ M-MLV有很好的熱穩(wěn)定性,可以輕松完成這些實驗。
產(chǎn)品特點:
◆缺失RNase H 活性:缺失RNase H 活性降低,有利于獲得更多全長 cDNA
◆熱穩(wěn)定好: 最適反應溫度50°C ,最高可在60°C下反轉(zhuǎn)錄,有效克服模板RNA的二級結(jié)構(gòu),順利完成反轉(zhuǎn)錄實驗。
◆作用溫度廣:可在37℃-60℃范圍內(nèi)進行反轉(zhuǎn)錄,在42℃-55℃范圍內(nèi)擁有最高活性的80%以上,客戶可根據(jù)需求自由選擇反應溫度。
◆擴增活性強:經(jīng)過突變增加了反轉(zhuǎn)錄酶和RNA的結(jié)合能力,增加了酶的擴增速度,可以獲得更高質(zhì)量的cDNA,滿足構(gòu)建cDNA文庫的要求。
產(chǎn)品來源:
重組E.coli菌株含有突變的M-MLV基因。
活性單位:
在37℃、10分鐘內(nèi),以poly(A).Oligo(dT)為模板/引物,摻入1 nmol的 [3H] dTTP所需要的酶量定義為1個活性單位(U) 。
擴增效果圖
上圖以小鼠總RNA為模板,反轉(zhuǎn)錄溫度50℃,a1、a2百泰克公司supermo III (200U,貨號PR6811),b1、b2 為I公司SuperScript? III (200U,貨號18080-044),c1、c2為T公司m-mlv(200U,貨號D2640S)