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一、原理簡介 百泰克獨(dú)特配方的植物 DNA 抽提液（添加多種針對植物特點(diǎn)的多糖、多酚 去除成份）迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶，只需一步離心即可去除多糖、多 酚和蛋白，取上清所得基因組 DNA 用異丙醇沉淀，再通過乙醇漂洗等步驟得到 純凈的 DNA。 二、注意事項(xiàng)（實(shí)驗(yàn)前必須首先閱讀這部分?。? 1． 所有的離心步驟均在室溫完成，使用離心力可以達(dá)到13,000rpm的高速 離心機(jī)。 2． 開始實(shí)驗(yàn)前將需要的試劑水浴先預(yù)熱到 65℃?zhèn)溆?，RNase A（10mg/ml） 請自備，TE 或者無酶水請自備。 3． 不同來源的植物組織材料中提取的DNA 的量會(huì)有差異，一般100mg新 鮮組織典型產(chǎn)量可達(dá)15-50μg。 4． 可以按比例放大提取的體系。 三、操作步驟 * 將 DNA 提取試劑放置在 65℃預(yù)熱。 1． 加熱 DNA 提取試劑到 65℃。 2． 取 50-100 mg 植物新鮮組織或 30 mg 干重組織在研缽中加入液氮充分碾 磨成細(xì)粉，或用研磨儀研磨（可以加入預(yù)熱的 DNA 提取試劑研磨）。 3． 轉(zhuǎn)移細(xì)粉到一個(gè) 1.5 ml 離心管中，加入 1ml~1.2ml 預(yù)熱好的 DNA 提取 試劑，再加入 10 μl RNase A 劇烈渦旋振蕩混勻 1 分鐘，65℃水浴 30 分 鐘（有些樣品 10 分鐘即可）。 4． 將離心管轉(zhuǎn)入離心機(jī)中 13,000 rpm 室溫離心 3 分鐘。 下面有兩種抽提方法： 無酚氯仿提取法： a． 小心吸取大約 800ul 上清到一個(gè)新的 2ml 離心管，注意不要吸到界面物  質(zhì)，加入 1.2ml 異丙醇充分混勻，13,000 rpm 離心 2 分鐘（板式離心機(jī) 4000g 的離心力 5min 左右也可以沉淀）。 注：吸取上清時(shí)，注意不要吸到殘?jiān)蛏蠈悠∥铮后w量可以略小于 800ul， 但要保證吸取的液體澄清，否則會(huì)影響最終 DNA 的純度。 b． 小心倒掉上清，注意不要倒掉沉淀，將幾張吸水紙巾放置在平面上， 使離心管倒置輕壓紙面，以盡可能地將殘留的液體排出。加入 1ml 的 70%乙醇震蕩漂洗 DNA，13,000 rpm 離心 2 分鐘。 注：這步如果異丙醇沒有去干凈，會(huì)導(dǎo)致有雜質(zhì)殘留，影響最終純度。 c． 小心倒掉上清，注意不要倒掉沉淀。同樣用吸水紙巾盡量吸取殘留液體。 保持開蓋狀態(tài)，室溫晾 2 分鐘左右使乙醇充分揮發(fā)，避免影響下游試驗(yàn)。 加入 100 μl TE，渦旋 5-10s 或用移液器吹打幾次，使得 DNA 充分溶解。 注：如果有部分沉淀無法溶解，可以離心后取上清使用。 d． DNA 可以存放在 2-8℃,如果要長時(shí)間存放，可以放置在-20℃。 酚氯仿提取法（不推薦）： a．轉(zhuǎn)移第 4 步 800ul 上清到一個(gè)新的 1.5 ml 離心管，加入等體積的酚：氯 仿：異戊醇=25：24：1 的混合液，渦旋振蕩 1min，室溫放置 5min。 b． 小心吸取上清到一個(gè) 2 ml 離心管，注意不要吸到界面物質(zhì)，與等體積 異丙醇混合均勻，13,000 rpm 離心 2 分鐘。 c. 小心倒掉上清，加入 1ml 的 70%乙醇漂洗 DNA，13,000 rpm 離心 2 分鐘。 d. 重復(fù)步驟 c。 a． e. 用槍盡可能吸取多余的乙醇，室溫 2 分鐘左右使乙醇揮發(fā)，加入 100 μl TE, 渦旋 5-10s 或用移液器吹打幾次，使得 DNA 充分溶解。 f. DNA 可以存放在 2-8℃,如果要長時(shí)間存放，可以放置在-20℃。